Tế bào gốc trưởng thành phân lập từ tủy xương:

Tế bào nấm men, đặc biệt là Pichia pastoris và Saccharomyces cerevisiae, thường tạo ra các chuỗi mannose glycosyl hóa. Các chuỗi mannose này có thể gây ra các vấn đề về miễn dịch và có khả năng gây ung thư khi sử dụng trong các ứng dụng điều trị ở người. Do đó, sự glycosyl hóa mannose là một nhược điểm của việc sử dụng nấm men làm tế bào chủ để sản xuất protein trị liệu.

Tế bào côn trùng ít glycosyl hóa mannose hơn so với nấm men, trong khi tế bào động vật có vú có hệ thống glycosyl hóa phức tạp hơn và có thể tạo ra các cấu trúc glycosyl hóa giống người hơn.

IFN (Interferon) tái tổ hợp là protein được sản xuất thông qua công nghệ sinh học tái tổ hợp gen. Để tinh chế IFN tái tổ hợp, có nhiều phương pháp có thể được sử dụng, và mỗi phương pháp dựa trên các nguyên tắc khác nhau để tách protein đích ra khỏi hỗn hợp phức tạp. Cụ thể:

1. Cột hấp phụ miễn dịch: Phương pháp này sử dụng kháng thể đặc hiệu gắn với chất nền rắn (ví dụ, hạt agarose). IFN sẽ liên kết đặc hiệu với kháng thể, trong khi các protein khác trôi qua. Sau đó, IFN được giải phóng khỏi cột bằng cách thay đổi pH hoặc sử dụng chất giải ly đặc hiệu. Đây là một phương pháp hiệu quả cao để tinh chế protein đích.


2. Điện di đẳng điện RIEF (Rotofor Isoelectric Focusing): Phương pháp này sử dụng điện trường để tách protein dựa trên điểm đẳng điện (pI) của chúng. Tuy nhiên, nó thường được sử dụng cho mục đích phân tích hoặc tách các protein có pI khác nhau rõ rệt, chứ không phải là phương pháp chính để tinh chế quy mô lớn.


3. HPLC (High-Performance Liquid Chromatography): Đây là một kỹ thuật sắc ký lỏng hiệu năng cao, có thể được sử dụng để tách protein dựa trên nhiều đặc tính khác nhau như kích thước, điện tích, hoặc tính kỵ nước. HPLC có thể được sử dụng để tinh chế IFN, nhưng cần lựa chọn cột sắc ký phù hợp (ví dụ, cột trao đổi ion, cột ái lực, hoặc cột gel lọc).


4. Sắc ký ái lực với Matrex Gel Blue A: Matrex Gel Blue A là một loại chất nền sắc ký ái lực có khả năng liên kết với nhiều loại protein, đặc biệt là các protein liên kết nucleotide. Phương pháp này ít đặc hiệu hơn so với sử dụng cột hấp phụ miễn dịch, và có thể không phù hợp để tinh chế IFN nếu cần độ tinh khiết cao.

Trong số các phương pháp trên, việc sử dụng cột hấp phụ miễn dịch (A) thường là phương pháp hiệu quả và đặc hiệu nhất để tinh chế IFN tái tổ hợp, vì nó dựa trên sự tương tác đặc hiệu giữa IFN và kháng thể của nó.

Câu hỏi này liên quan đến các kỹ thuật khuếch đại nucleic acid. Tính chu kỳ nhiệt là đặc trưng của phản ứng PCR (Polymerase Chain Reaction). Trong các lựa chọn được đưa ra, không có lựa chọn nào là PCR. Tuy nhiên, LCR (Ligase Chain Reaction) cũng có thể được thực hiện theo chu kỳ nhiệt để tăng độ đặc hiệu và hiệu quả của phản ứng. Do đó, LCR là đáp án phù hợp nhất trong các lựa chọn này.