Trong sắc kí lỏng hiệu năng cao để định tính các chất người ta thường dựa vào

Trong sắc kí lỏng hiệu năng cao (HPLC), thời gian lưu (retention time) là một thông số quan trọng được sử dụng để định tính các chất. Thời gian lưu là thời gian mà một chất phân tích cần để đi qua cột sắc ký từ lúc tiêm mẫu đến khi chất đó được phát hiện bởi detector. Mỗi chất có một thời gian lưu đặc trưng trên một cột sắc ký và điều kiện phân tích nhất định. Do đó, bằng cách so sánh thời gian lưu của một chất không biết với thời gian lưu của một chất chuẩn, ta có thể xác định được chất đó. Trong trường hợp cần thiết, sản phẩm sau khi ra khỏi cột có thể được thu thập và định danh bằng các kỹ thuật khác như khối phổ (MS), hồng ngoại (IR) và cộng hưởng từ hạt nhân (NMR) để xác nhận thêm. Các lựa chọn khác không chính xác vì: - Rf và Rs (các hệ số trong sắc ký lớp mỏng và độ phân giải) không phải là thông số chính để định tính trong HPLC. - Hệ số dung lượng K' được sử dụng để đánh giá khả năng lưu giữ của chất phân tích trên cột, nhưng không trực tiếp dùng để định tính. - Diện tích pic liên quan đến nồng độ của chất phân tích, không phải để định tính.