Nhược điểm của việc sử dụng Bacillus subtilis làm tế bào chủ là, NGOẠI TRỪ:

Để tinh chế IFN (Interferon) tái tổ hợp, có nhiều phương pháp có thể được sử dụng, tùy thuộc vào độ tinh khiết mong muốn và quy mô sản xuất. Tuy nhiên, phương pháp dùng cột hấp phụ miễn dịch và sắc ký ái lực thường được ưu tiên vì tính đặc hiệu và hiệu quả cao:

• A. Dùng cột hấp phụ miễn dịch: Đây là một phương pháp hiệu quả để tinh chế protein đích. Cột hấp phụ miễn dịch sử dụng kháng thể đặc hiệu gắn trên chất nền để liên kết và giữ lại IFN, sau đó rửa giải để thu được IFN tinh khiết.


• D. Sắc ký ái lực với Matrex Gel Blue A: Matrex Gel Blue A là một loại chất nền sắc ký ái lực có khả năng liên kết với nhiều loại protein, trong đó có IFN. Phương pháp này cũng cho phép tinh chế IFN dựa trên ái lực của nó với chất nền.


• B. Điện di đẳng điện RIEF: RIEF (Resolution Isoelectric Focusing) là một kỹ thuật điện di được sử dụng để phân tách protein dựa trên điểm đẳng điện của chúng. Mặc dù RIEF có thể được sử dụng để tinh chế protein, nhưng nó thường được sử dụng như một bước phân tích hoặc tinh chế bổ sung hơn là phương pháp chính để tinh chế IFN tái tổ hợp ở quy mô lớn.


• C. HPLC (High-Performance Liquid Chromatography): HPLC là một kỹ thuật sắc ký lỏng hiệu năng cao, có thể được sử dụng để tinh chế protein dựa trên nhiều đặc tính khác nhau như kích thước, điện tích, hoặc tính kỵ nước. HPLC có thể được sử dụng để tinh chế IFN, nhưng nó thường không đặc hiệu như cột hấp phụ miễn dịch hoặc sắc ký ái lực.

Trong các phương án trên, việc sử dụng cột hấp phụ miễn dịch (A) và sắc ký ái lực với Matrex Gel Blue A (D) là phổ biến và hiệu quả nhất trong tinh chế IFN tái tổ hợp. Tuy nhiên, đáp án A chính xác hơn vì tính đặc hiệu cao của kháng thể với IFN.

Ethidium bromide (EtBr) là một chất nhuộm huỳnh quang được sử dụng rộng rãi để phát hiện DNA trong các kỹ thuật sinh học phân tử như điện di gel agarose. EtBr chèn vào giữa các cặp base của DNA và phát huỳnh quang dưới ánh sáng UV, cho phép quan sát các đoạn DNA. Fluorescein và Rhodamine là các chất nhuộm huỳnh quang khác, nhưng chúng thường được sử dụng trong các ứng dụng khác, chẳng hạn như kính hiển vi huỳnh quang và xét nghiệm miễn dịch huỳnh quang, chứ không phải để phát hiện trực tiếp sản phẩm khuếch đại DNA trên gel.