Các yếu tố nào sau đây ảnh hưởng đến sự lưu giữ của cấu tử trên cột?

Câu 8:

Một hỗn hợp gồm paracetamol và caffeine được tách trên cột LC có 2304 đĩa lý thuyết. Thời gian lưu của Paracetamol và caffeine lần lượt là 4 phút và 2 phút. Độ phân giải của cột bằng?

Lời giải:

Đáp án đúng: D

Độ phân giải (Resolution - R) trong sắc ký lỏng (LC) được tính bằng công thức:

R = (√N / 4) * ((α - 1) / α) * (k2 / (1 + k2))

Trong đó:
- N là số đĩa lý thuyết.
- α là hệ số chọn lọc, α = tR2'/tR1' (tR' là thời gian lưu đã hiệu chỉnh, nhưng vì thời gian chết không được cung cấp, ta coi như tR tương ứng tỉ lệ với tR').
- k2 là hệ số dung lượng của chất thứ hai (chất có thời gian lưu lớn hơn), k2 = (tR2 - t0) / t0 (t0 là thời gian chết, nhưng vì không có thời gian chết, ta tính hệ số dung lượng theo thời gian lưu).

Trong trường hợp này, ta có:
- N = 2304
- tR1 (Paracetamol) = 4 phút
- tR2 (Caffeine) = 2 phút

Vì caffeine có thời gian lưu nhỏ hơn, caffeine sẽ là chất thứ nhất (tR1) và paracetamol là chất thứ hai (tR2).
Vậy, tR1 = 2 phút và tR2 = 4 phút.

Tính α:
α = tR2 / tR1 = 4 / 2 = 2

Vì không có thời gian chết (t0), ta không thể tính chính xác k2. Tuy nhiên, ta có thể ước tính dựa trên thời gian lưu:
k2 ≈ tR2 / tR1 = 4 / 2 = 2

Thay vào công thức tính độ phân giải:
R = (√2304 / 4) * ((2 - 1) / 2) * (2 / (1 + 2))
R = (48 / 4) * (1 / 2) * (2 / 3)
R = 12 * (1 / 2) * (2 / 3)
R = 12 * (1 / 3)
R = 4

Vậy, độ phân giải của cột là 4.

Câu 9:

Hiệu suất lượng tử huỳnh quang

Lời giải:

Đáp án đúng: A

Hiệu suất lượng tử huỳnh quang (hay còn gọi là hiệu suất lượng tử phát quang) được định nghĩa là tỉ số giữa số photon phát ra do huỳnh quang và số photon bị hấp thụ. Điều này tương đương với tỉ số giữa số phân tử phát huỳnh quang và tổng số phân tử bị kích thích. Do đó, phương án A là đáp án chính xác nhất.

Câu 10:

Chọn Đúng/Sai: Phương pháp thẩm phân thường được dùng để tách protein kích thước lớn ra khỏi dịch sinh học chứa các chất muối khoáng hòa tan kích thước nhỏ.

Lời giải:

Đáp án đúng: B

Phương pháp thẩm phân (dialysis) dựa trên sự khác biệt về kích thước giữa các phân tử. Một màng bán thấm được sử dụng, cho phép các phân tử nhỏ (như muối khoáng) đi qua, trong khi giữ lại các phân tử lớn (như protein). Do đó, thẩm phân được sử dụng để tách protein kích thước lớn ra khỏi các chất muối khoáng hòa tan kích thước nhỏ.

Câu 11:

Chọn Đúng/Sai: Thứ tự ra của các phân tử trong điện di mao quản là cation, phân tử trung hòa về điện và cuối cùng là anion.

Lời giải:

Đáp án đúng: A

Trong điện di mao quản, các ion sẽ di chuyển dưới tác dụng của điện trường. Các cation (ion dương) sẽ bị hút về phía cathode (điện cực âm) và di chuyển nhanh hơn. Các anion (ion âm) sẽ bị hút về phía anode (điện cực dương) và di chuyển chậm hơn. Các phân tử trung hòa về điện sẽ ít bị ảnh hưởng bởi điện trường và di chuyển chậm nhất. Do đó, thứ tự ra của các phân tử là cation, đến phân tử trung hòa và cuối cùng là anion.

Câu 12:

Các thông số sắc ký đặc trưng cho HPLC

Lời giải:

Đáp án đúng: B

Các thông số sắc ký đặc trưng cho HPLC bao gồm:

* tR (thời gian lưu): Thời gian từ khi tiêm mẫu đến khi chất phân tích đạt cực đại trên detector.
* VR (thể tích lưu): Thể tích pha động cần thiết để rửa giải chất phân tích ra khỏi cột.
* Rs (độ phân giải): Đo khả năng tách biệt hai chất phân tích.
* S (hệ số đối xứng): Đánh giá hình dạng pic sắc ký.
* As (độ bất đối xứng): Một cách khác để đánh giá hình dạng pic, thường được sử dụng để định lượng độ đuôi hoặc độ nhọn của pic.
* N (số đĩa lý thuyết): Đo hiệu quả của cột sắc ký.
* K (hệ số dung lượng hay hệ số lưu giữ): Đo mức độ chất phân tích tương tác với pha tĩnh.

Do đó, đáp án A là đáp án chính xác nhất vì bao gồm tất cả các thông số sắc ký quan trọng trong HPLC. Các đáp án khác thiếu một số thông số quan trọng như VR hoặc A.

Câu 13:

Cấu hình một máy HPLC theo thứ tự gồm:

Lời giải: