Một hỗn hợp gồm paracetamol và caffeine được tách trên cột LC có 2304 đĩa lý thuyết. Thời gian lưu của Paracetamol và caffeine lần lượt là 4 phút và 2 phút. Độ phân giải của cột bằng?
Trả lời:
Đáp án đúng: D
Độ phân giải (Resolution - R) trong sắc ký lỏng (LC) được tính bằng công thức:
R = (√N / 4) * ((α - 1) / α) * (k2 / (1 + k2))
Trong đó:
- N là số đĩa lý thuyết.
- α là hệ số chọn lọc, α = tR2'/tR1' (tR' là thời gian lưu đã hiệu chỉnh, nhưng vì thời gian chết không được cung cấp, ta coi như tR tương ứng tỉ lệ với tR').
- k2 là hệ số dung lượng của chất thứ hai (chất có thời gian lưu lớn hơn), k2 = (tR2 - t0) / t0 (t0 là thời gian chết, nhưng vì không có thời gian chết, ta tính hệ số dung lượng theo thời gian lưu).
Trong trường hợp này, ta có:
- N = 2304
- tR1 (Paracetamol) = 4 phút
- tR2 (Caffeine) = 2 phút
Vì caffeine có thời gian lưu nhỏ hơn, caffeine sẽ là chất thứ nhất (tR1) và paracetamol là chất thứ hai (tR2).
Vậy, tR1 = 2 phút và tR2 = 4 phút.
Tính α:
α = tR2 / tR1 = 4 / 2 = 2
Vì không có thời gian chết (t0), ta không thể tính chính xác k2. Tuy nhiên, ta có thể ước tính dựa trên thời gian lưu:
k2 ≈ tR2 / tR1 = 4 / 2 = 2
Thay vào công thức tính độ phân giải:
R = (√2304 / 4) * ((2 - 1) / 2) * (2 / (1 + 2))
R = (48 / 4) * (1 / 2) * (2 / 3)
R = 12 * (1 / 2) * (2 / 3)
R = 12 * (1 / 3)
R = 4
Vậy, độ phân giải của cột là 4.
